HiFi II M-MLV是经过突变的M-MLV基因利用大肠杆菌工程菌进行重组与表达的逆转录酶，该酶能够催化以RNA或DNA：RNA杂交链为模板的互补DNA聚合反应。经过突变的HiFi II M-MLV逆转录酶RNase H活性缺失，减少了逆转录反应中RNA的降解，更容易获得全长的cDNA。HiFi II M-MLV逆转录酶能在55℃合成一条链cDNA，提供更高的特异性，稳定性强，可以合成大12 kb的cDNA，cDNA产量高。适用于一链cDNA的合成、RT-PCR、RT-qPCR以及全长cDNA文库的构建等。