骨头和牙齿无需研磨预处理提取DNA方法的应用 / 弘德商城_公共安全产品网
骨头和牙齿无需研磨预处理提取DNA方法的应用
Takanashi K, Takagi Y, Ueda Y, Hata J, Ishizawa Y, Lim CR
DNA Chip Research Inc., 1-15-1 Kaigan, Suzue Baydium 5F, Minato-ku, Tokyo 105-0022, Japan
介绍
在法医科学领域使用从骨头或牙齿中提取的DNA进行个体识别是非常常见的。从硬组织中提取DNA需要在控制极好的环境中进行研磨，以防止粉末样品的交叉污染。为了克服此类组织DNA提取的困难，我们引入了液基样品预处理试剂，Tbone EX Kit。从整个牙齿或骨头切片中直接提取DNA只需使用试剂盒中的三种溶液进行顺序处理即可，而无需进行问题诸多的研磨步骤。在本研究中，我们使用Tbone Ex Kit和包括PrepFiler BTA在内的多种不同的纯化方法提取的牙齿样品进行了STR分型实验。我们也尝试了提取年代久远的火葬的骨头样品的DNA，也将分享经验和技巧。
实验和结果
1. 实验流程
一个牙齿和两块年代久远的火葬的骨头样品使用Tbone EX Kit进行处理，未进行研磨。
男性个体，40s
样品重量，2.1g
智齿，腐败的，移除神经
室温保存约1年
实验流程图
2.牙齿
图1. 牙齿样品两轮抽提STR图谱
表1. 牙齿样品的DNA产量和STR位点
使用Globalfiler试剂盒进行STR实验，使用Genemapper ID-X 1.4分析数据。在第二轮抽提后，检出了所有的24个位点。
3.年代久远的火葬的骨头
样品1：火葬的男性个体（~1915），50岁，样品重量1.38g
样品2：火葬的男性个体（~1867），2岁，样品重量1.05g
图2. 年代久远的火葬的骨头的STR图谱
表2 年代久远的火葬的骨头样品的DNA产量和位点
结论
1.因为无需进行研磨，使用Tbone EX Kit提取骨头和牙齿的DNA可以减少手工操作操作时间。
2.提取的DNA质量足够满足STR分型等后续的法医实验。
3.从年代久远的火葬的样品中提取DNA是非常困难的，特别是提取DNA的样品被灼烧过。然而，我们仍然可以从经过火葬的部分或不完整的部分提取出DNA。
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